Mycobacterium Tuberculosis nukleiinhappe ja rifampitsiini resistentsus
Toote nimi
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis nukleiinhappe ja rifampitsiini resistentsuse tuvastamise komplekt (sulamiskõver)
Tunnistus
CE
Epidemioloogia
Mycobacterium tuberculosis ehk lühidalt Tubercle bacillus ehk TB on tuberkuloosi põhjustav patogeenne bakter. Praegu on esmavaliku tuberkuloosiravimite hulka kuuluvad isoniasiid, rifampitsiin ja heksambutool jne. Teise valiku tuberkuloosiravimite hulka kuuluvad fluorokinoloonid, amikatsiin ja kanamütsiin jne. Uued ravimid on linesoliid, bedakviliin ja delamani jne. Tuberkuloosiravimite vale kasutamise ja Mycobacterium tuberculosis'e rakuseina struktuuri iseärasuste tõttu tekib Mycobacterium tuberculosis'el aga ravimiresistentsus tuberkuloosiravimite suhtes, mis tekitab tõsiseid väljakutseid tuberkuloosi ennetamisel ja ravimisel.
Rifampitsiini on laialdaselt kasutatud kopsutuberkuloosihaigete ravis alates 1970. aastate lõpust ja sellel on märkimisväärne mõju. See on olnud esimene valik kopsutuberkuloosihaigete keemiaravi lühendamiseks. Rifampitsiiniresistentsus on peamiselt põhjustatud rpoB geeni mutatsioonist. Kuigi pidevalt tuleb välja uusi tuberkuloosivastaseid ravimeid ja ka kopsutuberkuloosihaigete kliiniline efektiivsus on jätkuvalt paranenud, on tuberkuloosivastaseid ravimeid endiselt suhteliselt vähe ning irratsionaalse ravimite tarvitamise nähtus kliinilises praktikas on suhteliselt suur. Ilmselgelt ei saa kopsutuberkuloosiga patsientidel esinevat Mycobacterium tuberculosist õigeaegselt täielikult hävitada, mis viib lõpuks patsiendi kehas erineva ravimiresistentsuse astmeni, pikendab haiguse kulgu ja suurendab patsiendi surmaohtu.
Kanal
Kanal | Kanalid ja fluorofoorid | Reaktsioonipuhver A | Reaktsioonipuhver B | Reaktsioonipuhver C |
FAM-kanal | Reporter: FAM, Kustutaja: Puudub | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD ja IS6110 |
CY5 kanal | Reporter: CY5, Kustutaja: Puudub | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) kanal | Reporter: HEX (VIC), Kustutaja: Puudub | Sisekontroll | Sisekontroll | Sisekontroll |
Tehnilised parameetrid
Ladustamine | ≤-18 ℃ pimedas |
Säilivusaeg | 12 kuud |
Proovi tüüp | Röga |
CV | ≤5,0% |
LoD | mükobakteri tuberkuloos 50 bakterit/ml rifampitsiiniresistentne metsiktüüp: 2x103bakterid/ml homosügootne mutant: 2x103bakterid/ml |
Spetsiifilisus | See tuvastab metsiktüüpi mükobakteri tuberkuloosi ja teiste ravimiresistentsusgeenide, näiteks katG 315G>C\A, InhA-15C>T, mutatsioonikohti; testi tulemused ei näita rifampitsiiniresistentsust, mis tähendab ristreaktiivsust. |
Kohaldatavad instrumendid: | SLAN-96P reaalajas PCR-süsteemid BioRad CFX96 reaalajas PCR-süsteem LightCycler480® reaalaja PCR-süsteem |
Töövoog
Kui ekstraheerimiseks kasutatakse Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Macro & Micro-Test General DNA/RNA komplekti (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (mida saab kasutada koos Macro & Micro-Test automaatse nukleiinhappe ekstraktoriga (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) või Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA kolonni (HWTS-3022-50), lisage järjestikku 200 μL positiivset kontrolli, negatiivset kontrolli ja töödeldud rögaproovi ning lisage eraldi 10 μL sisemist kontrolli positiivsele kontrollile, negatiivsele kontrollile ja töödeldud rögaproovile. Järgnevad etapid tuleks rangelt läbi viia vastavalt ekstraheerimisjuhistele. Ekstraheeritud proovi maht on 200 μL ja soovitatav elueerimismaht on 100 μL.