Karbapeneemi resistentsuse geen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Tootenimi
HWTS-OT045 karbapeneemi resistentsuse geen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) tuvastuskomplekt (fluorestsents-PCR)
Epidemioloogia
Karbapeneemantibiootikumid on ebatüüpilised β-laktaamantibiootikumid, millel on kõige laiem antibakteriaalne spekter ja tugevaim antibakteriaalne toime.Tänu β-laktamaasi stabiilsusele ja madalale toksilisusele on sellest saanud üks tähtsamaid antibakteriaalseid ravimeid raskete bakteriaalsete infektsioonide raviks.Karbapeneemid on väga stabiilsed plasmiidide vahendatud laiendatud spektriga β-laktamaaside (ESBL), kromosoomide ja plasmiidvahendatud tsefalosporinaaside (AmpC ensüümide) suhtes.
Kanal
PCR-segu 1 | PCR-segu 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/HEX | Sisekontroll | Sisekontroll |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Tehnilised parameetrid
Säilitamine | ≤-18 ℃ |
Säilitusaeg | 12 kuud |
Proovi tüüp | Röga, puhtad kolooniad, rektaalne tampoon |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0% |
LoD | 103CFU/ml |
Spetsiifilisus | a) Komplekt tuvastab standardiseeritud ettevõtte negatiivsed viited ja tulemused vastavad vastavate viidete nõuetele. b) Ristreaktiivsuse testi tulemused näitavad, et sellel komplektil ei ole ristreaktsiooni teiste hingamisteede patogeenidega, nagu Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxyusace, Hacinetobacter Acinet junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratoorse adenoviirus, Enterococcus või teisi ravimiresistentseid geene CTX, mecA, SME, SHV, TEM jne sisaldavad proovid. c) Häirevastane: Mutsiin, minotsükliin, gentamütsiin, klindamütsiin, imipeneem, tsefoperasoon, meropeneem, tsiprofloksatsiinvesinikkloriid, levofloksatsiin, klavulaanhape, roksitromütsiin valitakse interferentsi testiks ja tulemused näitavad, et ülalmainitud segavatel reaktsioonidel ei ole. karbapeneemi resistentsuse geenide KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM ja IMP tuvastamiseks. |
Kohaldatavad instrumendid | Applied Biosystems 7500 reaalajas PCR-süsteemid QuantStudio®5 reaalajas PCR-süsteemid SLAN-96P reaalajas PCR-süsteemid (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 reaalajas PCR-süsteem LineGene 9600 Plus reaalajas PCR-tuvastussüsteem (FQD-96A,HangzhouBioer tehnoloogia) MA-6000 reaalajas kvantitatiivne termotsükkel (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 reaalajas PCR süsteem BioRad CFX Opus 96 reaalajas PCR-süsteem |
Töövoog
Valik 1.
Soovitatav ekstraheerimisreaktiiv: makro- ja mikrotesti üldine DNA/RNA komplekt (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (mida saab kasutada koos makro- ja mikrotesti automaatse nukleiinhappe ekstraktoriga (HWTS-3006C, HWTS-3006B)), mille on koostanud Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Lisage 200 μL tavalist soolalahust talluse sade.Järgmised sammud peaksid järgima ekstraheerimise juhiseid ja soovitatav elueerimismaht on100 μL.
2. variant.
Soovitatav ekstraheerimisreaktiiv: Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. nukleiinhappe ekstraheerimis- või puhastusreaktiiv (YDP302). Ekstraheerimist tuleb alustada rangelt vastavalt kasutusjuhendi 2. etapile (lisage talluse sademele 200 µl puhvrit GA ja loksutage, kuni tallus on täielikult hõljunud).Kasutage elueerimiseks RNaasi/DNaasi vaba vett ja soovitatav elueerimismaht on 100 μL.
3. võimalus.
Soovitatav ekstraheerimisreaktiiv: makro- ja mikrotesti proovi vabastav reaktiiv.Rögaproovi tuleb pesta, lisades ülalmainitud töödeldud talluse sademele 1 ml tavalist soolalahust, tsentrifuugida kiirusel 13 000 p/min 5 minutit ja supernatant visatakse ära (jätke alles 10–20 µL supernatanti).Puhta koloonia ja rektaalse tampooni jaoks lisage 50 μL proovi vabastavat reaktiivi otse ülalmainitud töödeldud talluse sademele ja järgnevad etapid tuleb vastavalt kasutusjuhendile ekstraheerida.