KRAS 8 mutatsioonide tuvastamise komplekt (fluorestsents-PCR) – RUO
Toote nimi
KRAS 8 mutatsioonide tuvastamise komplekt (fluorestsents-PCR) – RUO
Epidemioloogia
KRAS-geeni punktmutatsioone on leitud mitmetes inimese kasvajatüüpides: kasvajates on mutatsioonimäär umbes 17–25%, kopsuvähihaigetel 15–30% ja kolorektaalvähihaigetel 20–50%. Kuna K-ras-geeni kodeeritav P21 valk asub EGFR-i signaaliülekande rajast allavoolu, siis pärast K-ras-geeni mutatsiooni on allavoolu signaalirada alati aktiveeritud ja seda ei mõjuta EGFR-ile suunatud ülesvoolu ravimid, mille tulemuseks on rakkude pidev pahaloomuline proliferatsioon. K-ras-geeni mutatsioonid põhjustavad kopsuvähihaigetel üldiselt resistentsust EGFR-i türosiinkinaasi inhibiitorite suhtes ja kolorektaalvähihaigetel resistentsust EGFR-i vastaste antikehade suhtes [1, 2, 3]. 2008. aastal avaldas riiklik vähivõrgustik (NCCN) kolorektaalvähi kliinilise praktika juhise, milles toodi välja, et K-ras-i aktiveerimist põhjustavad mutatsioonikohad asuvad peamiselt eksoni 2 koodonites 12 ja 13, ning soovitati, et kõiki kaugelearenenud metastaatilise kolorektaalvähiga patsiente tuleks enne ravi K-ras-mutatsiooni suhtes testida [4]. Seetõttu on K-ras geeni mutatsiooni kiire ja täpne tuvastamine kliinilises ravimijuhtimises väga oluline. See komplekt kasutab DNA-d tuvastusproovina mutatsiooni staatuse kvalitatiivseks hindamiseks, mis aitab arstidel skriinida kolorektaalvähki, kopsuvähki ja teisi kasvajaga patsiente, kes saavad kasu sihipärastest ravimitest. Komplekti testi tulemused on ainult kliiniliseks võrdluseks ja neid ei tohiks kasutada patsientide individuaalse ravi ainsa alusena. Arstid peaksid testi tulemuste kohta tegema põhjalikke otsuseid, mis põhinevad sellistel teguritel nagu patsiendi seisund, ravimite näidustused, ravivastus ja muud laboratoorsete testide näitajad.
Tehnilised parameetrid
| Ladustamine | ≤-18 ℃ |
| Säilivusaeg | 12 kuud |
| Proovi tüüp | inimese parafiini manustatud patoloogilised lõigud |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | a) K-ras reaktsioonipuhver A ja K-ras reaktsioonipuhver B suudavad stabiilselt tuvastada 1% mutatsioonimäära 3 ng/μL metsiktüüpi tausta kontsentratsioonil; b) Mutatsioon 1×103Koopiaid/ml saab stabiilselt tuvastada metsiktüüpi taustal 1×105Koopiat/ml, kui mutatsioonimäär on 1%; c) Kui testitakse ettevõtte LoD viitenumbrit SW3, siis reaktsioonipuhvril A ja reaktsioonipuhvril B puudub Ct-väärtus või on Ct-väärtus=0. |
| Kohaldatavad instrumendid | Applied Biosystems 7500 reaalaja PCR-süsteemid, Applied Biosystems 7300 reaalaja PCR-süsteemid, QuantStudio®5 reaalaja PCR-süsteemid, LightCycler® 480 reaalaja PCR-süsteem, BioRad CFX96 reaalaja PCR-süsteem. |
Töövoog
Vajalik, kuid mitte kaasasolev reagent:DNaasi/RNaasi vaba H2O, veevaba etanool. Parafiini sisestatud koeproovi testimisel on soovitatav kasutada QIAGENi QIAamp DNA FFPE koekomplekti (56404) ja parafiini sisestatud koe-DNA kiirekstraktsioonikomplekti (DP330), mille tootja on Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.
Vajalikud, kuid komplekti mittekuuluvad tarbekaubad:DNaasi/RNaasi-vabad otsikud, ühekordsed kindad, DNaasi/RNaasi-vaba tsentrifuugiklaas, 8-klambriga ribad, tsentrifuug.







