Clostridium difficile toksiini A/B geen (C.diff)
Toote nimi
HWTS-OT031A nukleiinhappe tuvastamise komplekt Clostridium difficile toksiini A/B geeni (C.diff) määramiseks (fluorestsents-PCR)
Tunnistus
CE
Epidemioloogia
Clostridium difficile (CD), grampositiivne anaeroobne sporogeenne Clostridium difficile, on üks peamisi nosokomiaalseid sooleinfektsioone põhjustavaid patogeene. Kliiniliselt on umbes 15–25% antimikroobsete ravimitega seotud kõhulahtisusest, 50–75% antimikroobsete ravimitega seotud koliidist ja 95–100% pseudomembranoossest enteriidist põhjustatud Clostridium difficile infektsioonist (CDI). Clostridium difficile on tinglik patogeen, mis hõlmab nii toksigeenseid kui ka mittetoksigeenseid tüvesid.
Kanal
| FAM | tcdAgeen |
| ROX | tcdBgeen |
| VIC/HEX | Sisekontroll |
Tehnilised parameetrid
| Ladustamine | ≤-18 ℃ |
| Säilivusaeg | 12 kuud |
| Proovi tüüp | väljaheide |
| Tt | ≤38 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 200 CFU/ml |
| Spetsiifilisus | Selle komplekti abil saab tuvastada teisi soolepatogeene, näiteks Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, B-grupi streptokokk, Clostridium difficile mittepatogeensed tüved, adenoviirus, rotaviirus, noroviirus, A-gripiviirus, B-gripiviirus ja inimese genoomne DNA, kuid tulemused on kõik negatiivsed. |
| Kohaldatavad instrumendid | Applied Biosystems 7500 reaalajas PCR-süsteemid Applied Biosystems 7500 kiired reaalajas PCR-süsteemid QuantStudio®5 reaalajas PCR-süsteemi SLAN-96P reaalajas PCR-süsteemid (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Valgustsükliga®480 reaalajas PCR-süsteem LineGene 9600 Plus reaalajas PCR-i tuvastussüsteem (FQD-96A，HangzhouBiotehnoloogia) MA-6000 reaalajas kvantitatiivne termotsükler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 reaalajas PCR-süsteem BioRad CFX Opus 96 reaalajas PCR-süsteem |
Töövoog
Variant 1.
Lisage sadele 180 μl lüsosüümipuhvrit (lahjendage lüsosüüm lüsosüümi lahjendiga kontsentratsioonini 20 mg/ml), segage pipetiga korralikult ja töödelge temperatuuril 37 °C kauem kui 30 minutit. Võtke 1,5 ml RNaasi/DNaasi-vaba tsentrifuugituubi ja lisage180 μL positiivset ja negatiivset kontrolli järjest. Lisage10Lisage testitavale proovile μL sisemist kontrolli, positiivset kontrolli ja negatiivset kontrolli järjestikku ning kasutage järgnevaks proovi DNA ekstraheerimiseks Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. nukleiinhappe ekstraheerimis- või puhastusreagenti (YDP302), järgides rangelt konkreetsete etappide kasutusjuhiseid. Kasutage DNaasi/RNaasi-vaba H2O elueerimiseks ja soovitatav elueerimismaht on 100 μL.
Variant 2.
Võtke 1,5 ml RNaasi/DNaasi-vaba tsentrifuugituubi ja lisage järjestikku 200 μl positiivset ja negatiivset kontrolli. Lisage10Lisage testitavale proovile μL sisemist kontrolli, seejärel positiivset kontrolli ja negatiivset kontrolli järjestikku ning kasutage Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA komplekti (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) ja Macro & Micro-Test automaatset nukleiinhappe ekstraktorit (HWTS-3006). Ekstraheerimine tuleks läbi viia rangelt vastavalt kasutusjuhendile ja soovitatav elueerimismaht on 80 μL.
